[1]柳丽平,李杰,王翠,等.杜氏盐藻cDNA文库的构建及KCBP基因的克隆[J].郑州大学学报(医学版),2010,(06):907.
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杜氏盐藻cDNA文库的构建及KCBP基因的克隆
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《郑州大学学报(医学版)》[ISSN:1671-6825/CN:41-1340/R]

卷:
期数:
2010年06期
页码:
907
栏目:
论著
出版日期:
2010-11-30

文章信息/Info

作者:
柳丽平李杰王翠
郑州大学生物工程系细胞生物学研究室 郑州 450001
关键词:
杜氏盐藻cDNA文库类驱动蛋白钙调素结合蛋白
文献标志码:
A
摘要:
目的:构建杜氏盐藻cDNA文库并从该文库中筛选类驱动蛋白钙调素结合蛋白(KCBP)基因cDNA序列。〖HTH〗方法〖HTSS〗:取对数生长期的杜氏盐藻细胞,提取总RNA并分离纯化mRNA,反转录合成双链cDNA,连接到pAP3neo载体上,采用电转化法将重组质粒转化大肠杆菌DH10B。计算平板上单菌落数,测定文库的滴定度和重组率。运用PCR法筛选含有KCBP基因特异片段的质粒。〖HTH〗结果〖HTSS〗:文库滴定度为5.6×106 pfu/mL, 重组率在90%左右,插入片段长度在0.4~6.0 kb,平均长度为1.9 kb。利用PCR法从该文库中筛选到了含有新基因KCBP特异片段的单菌落,经测序与cDNA末端快速扩增(RACE)GAAB2PCR 获得的杜氏盐藻KCBP 基因cDNA序列相符, 此序列属于kinesinGAAB214 家族。〖HTH〗结论〖HTSS〗:成功构建杜氏盐藻cDNA文库,并从该文库筛选出一个kinesin样cDNA序列。

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更新日期/Last Update: 2010-12-01